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自動細(xì)胞計數(shù)儀因其能夠快速、精確地提供細(xì)胞計數(shù)結(jié)果而廣受歡迎。盡管有這些優(yōu)點，但驗證其準(zhǔn)確性以確保可靠的細(xì)胞計數(shù)結(jié)果至關(guān)重要。微球常被用于驗證流式細(xì)胞儀和自動細(xì)胞計數(shù)儀等設(shè)備。但使用微球存在各種問題，促使了細(xì)胞計數(shù)儀驗證載玻片的研發(fā)，用于驗證點成LUNA™細(xì)胞計數(shù)儀系列。
在本文中，我們將探討細(xì)胞計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，以及使用細(xì)胞計數(shù)儀驗證載玻片來驗證點成LUNA™細(xì)胞計數(shù)儀系列的優(yōu)勢。
ISO 20391 標(biāo)準(zhǔn)的制定是為了為準(zhǔn)確的細(xì)胞計數(shù)提供指導(dǎo)，并確保細(xì)胞計數(shù)結(jié)果的可靠性。該標(biāo)準(zhǔn)概述了一種通過系列稀釋實驗來驗證細(xì)胞計數(shù)測量質(zhì)量的方案，當(dāng)沒有參考材料時可以使用該方案。然而這個過程可能既耗時又復(fù)雜，需要進(jìn)行復(fù)雜的計算來確定決定系數(shù)和比例系數(shù)。
為了克服這一挑戰(zhàn)，建議使用參考材料以確保測量的可追溯性、便于進(jìn)行比較并驗證測量過程。的方法是將平均分析結(jié)果與從有證參考材料中獲得的參考值進(jìn)行比較，從而無需進(jìn)行復(fù)雜的計算。盡管如此，選擇合適的參考材料仍然面臨挑戰(zhàn)。
驗證微球，如美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院（NIST）微球，常被用作涉及粒徑和計數(shù)的各種分析方法中的參考材料。這些微球具有已知的大小和濃度，常被用作流式細(xì)胞術(shù)、顯微鏡檢查和其他類似技術(shù)的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)。但是NIST 微球沒有熒光形式，不適合測試細(xì)胞活力。
雖然商用熒光微球可以作為替代，但移液過程中的誤差以及長期儲存期間的蒸發(fā)可能會影響其準(zhǔn)確性，這需要小心處理和反復(fù)測試。因此目前沒有可用于細(xì)胞活力評估的商用參考材料。
選擇自行在內(nèi)部制備參考材料的用戶將不得不依賴手動計數(shù)，手動計數(shù)相對不精確，并且需要大量的樣本。或者可以使用流式細(xì)胞術(shù)，盡管獲得計數(shù)結(jié)果可能具有挑戰(zhàn)性，這種方法不太方便用戶操作。因此需要找到一種替代的細(xì)胞活力評估方法。
使用具有穩(wěn)定性和一致性的參考材料對于確保細(xì)胞計數(shù)的準(zhǔn)確結(jié)果至關(guān)重要。一種能夠提供這種質(zhì)量控制水平的選擇是使用驗證載玻片。這些載玻片包含預(yù)先點樣的圖案或預(yù)先固定的熒光微球，上面有已知數(shù)量的物體，消除了諸如因樣本加載導(dǎo)致的濃度變化、儲存期間的蒸發(fā)或分布不均等問題。
此外，驗證載玻片允許使用細(xì)胞計數(shù)儀的明場和熒光光學(xué)系統(tǒng)來驗證總細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞活力。與其他設(shè)備進(jìn)行交叉驗證也很簡單，并且其穩(wěn)定性確保即使長期儲存或反復(fù)使用，測量值也能保持一致。通過使用驗證載玻片，研究人員可以節(jié)省原本用于進(jìn)行額外實驗以確保準(zhǔn)確性的時間和資源。
細(xì)胞計數(shù)儀驗證載玻片方案通過提供一種簡單而高效的替代微球的方法，簡化并改進(jìn)了驗證細(xì)胞計數(shù)儀準(zhǔn)確性的過程。這種方法節(jié)省了時間，并提供了一種簡便的方法來驗證細(xì)胞計數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
要使用細(xì)胞計數(shù)儀驗證載玻片方案，請按照以下簡單步驟操作：1)檢查細(xì)胞計數(shù)儀驗證載玻片標(biāo)簽上的細(xì)胞濃度和細(xì)胞活力值。2)將載玻片插入細(xì)胞計數(shù)設(shè)備中。3)使用 “IQOQ” 方案開始計數(shù)。4)記錄總細(xì)胞濃度和細(xì)胞活力值。
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