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細(xì)胞計數(shù)專題 | 使用點(diǎn)成LUNA-III™自動細(xì)胞計數(shù)儀進(jìn)行精準(zhǔn)細(xì)胞尺寸測量

來源:廣州虹科電子科技有限公司   2025年06月21日 12:08   1

1 引言

在生物醫(yī)學(xué)研究和生物制造等領(lǐng)域,細(xì)胞尺寸可是個關(guān)鍵參數(shù)。它就像細(xì)胞的 “健康密碼”,能反映細(xì)胞的健康狀況和質(zhì)量。在生物制造過程中,細(xì)胞尺寸更是評估批次培養(yǎng)細(xì)胞質(zhì)量、細(xì)胞治療原料質(zhì)量的重要依據(jù)。所以,能精準(zhǔn)測量細(xì)胞尺寸的自動細(xì)胞計數(shù)儀,對相關(guān)研究和生產(chǎn)來說至關(guān)重要。

點(diǎn)成 LUNA-III™自動細(xì)胞計數(shù)儀,繼承了 LUNA™系列設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)尺寸分選功能,不僅能高精度地測量細(xì)胞尺寸,還能在計數(shù)過程中及計數(shù)后,對細(xì)胞群體進(jìn)行分類分析。今天,就來給大家詳細(xì)講講,這款儀器在六種 NIST 可溯源粒徑標(biāo)準(zhǔn)及 3T3 細(xì)胞系上的測量精度和尺寸分選能力。

2 材料與方法

#細(xì)胞系與試劑 #

本次實(shí)驗選用 3T3 細(xì)胞系,培養(yǎng)基是含有 10% 胎牛血清和 1% 的 DMEM。我們用 0.4% 臺盼藍(lán)(貨號 T13101)來評估細(xì)胞存活率。另外,為了驗證儀器尺寸測量的精度,還準(zhǔn)備了六種 NIST 可溯源粒徑標(biāo)準(zhǔn),它們的粒徑分別是 9.98、20.85、30.04、43.33、50.00 和 57.43 µm。

#基于 NIST 可溯源粒徑標(biāo)準(zhǔn)的精度驗證 #

NIST 可溯源粒徑標(biāo)準(zhǔn)由美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究院(NIST)提供,可作為的測量基準(zhǔn)?使用這些標(biāo)準(zhǔn)顆粒評估點(diǎn)成 LUNA-III™ 的測量精度,結(jié)果表明其尺寸測量準(zhǔn)確度達(dá) 95.2% 以上,進(jìn)一步驗證了 其在尺寸測量中的高精度(圖1)?

圖 1:(A)點(diǎn)成LUNA-III™ 計數(shù)的NIST 可溯源粒徑標(biāo)準(zhǔn)(NT27N?NT30N?NT32N?NT33N?NT34N?#64200)圖像,紅色圓圈標(biāo)示檢測出的顆粒?(B)表格對比NIST 標(biāo)準(zhǔn)粒徑尺寸與點(diǎn)成LUNA-III™測量值及其精度百分比?(C)散點(diǎn)圖顯示了點(diǎn)成LUNA-III™測量值與NIST 標(biāo)準(zhǔn)值的線性關(guān)系,R2 值達(dá)0.9999,表明其具備的線性度和準(zhǔn)確性?

#細(xì)胞尺寸測量 #

為了評估點(diǎn)成LUNA-III™的尺寸測量準(zhǔn)確性,我們混合了六種NIST可溯源粒徑樣本,并將計數(shù)范圍設(shè)定在 1 µm 至 90 µm 之間。計數(shù)完成后,系統(tǒng)生成細(xì)胞濃度與尺寸分布直方圖,并精準(zhǔn)分類各尺寸標(biāo)準(zhǔn)顆粒。利用靈活的尺寸分選功能,可在計數(shù)后立即調(diào)整尺寸范圍,對目標(biāo)尺寸進(jìn)行精確標(biāo)定,使測量準(zhǔn)確度超過98%。

圖 2:點(diǎn)成LUNA-III™在不同尺寸范圍(8~12 µm、18~22 µm、28~32 µm、41~45 µm、48~52 µm、55~59 µm)內(nèi)對NIST標(biāo)準(zhǔn)顆粒進(jìn)行檢測與尺寸分選的示例圖,每個圖像均配有相應(yīng)的直方圖,以展示粒徑分布情況。

#3T3 細(xì)胞尺寸測量 #

為了評估點(diǎn)成LUNA-III™根據(jù)尺寸篩選3T3細(xì)胞(已知尺寸約18 µm)的能力,我們設(shè)定了多個尺寸分選范圍7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm、16~20 µm(圖 3)。結(jié)果顯示,點(diǎn)成LUNA-III™能精準(zhǔn)檢測并篩選符合各尺寸范圍的3T3細(xì)胞,同時相應(yīng)的直方圖也清晰展示了細(xì)胞尺寸分布情況,證明其在不同尺寸范圍內(nèi)均能實(shí)現(xiàn)可靠、精準(zhǔn)的測量。

圖 3:點(diǎn)成LUNA-III™計數(shù)的3T3細(xì)胞圖像,顯示細(xì)胞在 7~24 µm、1~11 µm、12~24 µm和16~20 µm之間的尺寸分選情況,橙色圓圈標(biāo)示檢測到的細(xì)胞。相應(yīng)直方圖展示了各尺寸范圍內(nèi)的細(xì)胞分布情況。

3 結(jié)論

點(diǎn)成LUNA-III™自動細(xì)胞計數(shù)儀可提供精準(zhǔn)、可靠的細(xì)胞尺寸測量。在NIST可溯源粒徑標(biāo)準(zhǔn)的驗證下,其測量準(zhǔn)確度達(dá)95.2%以上,并成功對混合粒徑顆粒及3T3細(xì)胞進(jìn)行精準(zhǔn)分類和尺寸分選,準(zhǔn)確度超過98%。

點(diǎn)成LUNA-III™具備以下優(yōu)勢:

精準(zhǔn)測量:適用于各種顆粒尺寸和細(xì)胞類型

可靠分選:確保細(xì)胞群體的精確分類

高重復(fù)性:測量結(jié)果一致性強(qiáng)

這些優(yōu)勢使點(diǎn)成LUNA-III™自動細(xì)胞計數(shù)儀成為細(xì)胞尺寸、健康狀況和質(zhì)量評估的理想工具。

LUNA-III™自動細(xì)胞計數(shù)儀

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