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由以上可知，微生物的定量分析并不是像我們想的那樣，把試管一放，儀器一按，就可以得到答案的。下面就為您解答，當拿到一份未知濃度的細菌培養液時，怎樣用OD值來進行定量分析。

（1）怎樣選的波長？
答：一般都采用550-650，其實如果波長一定的話，即之后做標準曲線也是當時測量的波長的話，基本沒什么影響。

（2）如果菌液超出該菌種濃度的適用范圍呢？
答：可以稀釋。同行們有個0.2-0.7的說法，但具體如何，感覺也和微生物種類有很大關系。反正如果太濃的話，一定要稀釋就對了。

（3）測完OD值，你就知道該菌液的微生物數量了？
答：還沒有。還存在2個問題：
①測量OD值的結果反映一般只是總菌數。在對數生長期時，OD值和活菌數呈現一定的線性關系，但穩定期時，細菌的一部分在生長，一部分已經死亡，此時反映的只能是總菌數的增多，但活菌數卻無法反映。
②當菌體較為規則，菌群分布較為均勻，干擾OD測量的因素較少，但對于菌體過大或絲狀菌體懸液，如絲狀真菌，則會因為分布均勻度及折射反射影響光吸收等問題導致測量結果不準確。

解決方案：一般行業中，有估算1 OD=10^8 cells/ml。但是還需要結合具體的菌種，這里推薦方法是可以提前測量一下該菌種的標準曲線或得到一個相關的方程式。橫坐標是OD值，縱坐標是該微生物較的計數指標，采用顯微鏡計數、涂板菌落計數等，或者流式細胞儀都可以，然后你進行換算即可得到菌液的微生物數量了。